A) Aspiration d'un spermatozoïde dans la pipette d'injection
Les spermatozoïdes motiles (possédant la capacité de féconder) se concentrent à l'interface entre la goutte de milieu de culture et l'huile de protection. Un seul spermatozoïde est aspiré dans la pipette d'injection.
B) Immobilisation du spermatozoïde
Le flagelle du spermatozoïde doit être cassé de manière à détruire l'intégrité de sa membrane. Le spermatozoïde est freiné dans un milieu visqueux puis son flagelle est cassé à l'aide de la pointe de la pipette d'injection. Finalement, il est aspiré à nouveau dans la pipette d'injection.
C) Fixation de l'ovocyte sur la pipette de contention
L'ovocyte est alors fixé sur la pipette de contention de manière à ce que le globule polaire se trouve à 6 h (comme dans ce cas) ou à 12 h. Cette position empêche que le noyau cellulaire, qui se trouve à proximité du globule polaire, ne soit endommagé durant l'injection.