In der Tat kugelt sich der Neuroblast ab, und er entfernt sich von der inneren Grenzmembran, so dass eine neue Schicht, die Intermediärzone (Mantelzone) entsteht 21 (siehe auch "mehr dazu"). Aus dieser Zellschicht geht dann konsequenterweise die graue Substanz des ZNS hervor. Den auswandernden Neuroblasten dient die Radiärfaserglia als Leitstruktur.
Schliesslich bilden die zunächst kugeligen Neuroblasten ihre Zellfortsätze aus, also die Dendriten und die Axone. Diese dehnen sich in die Peripherie aus, so dass die dritte Schicht, die Marginalzone entsteht. Da diese Schicht des Neuralrohrs keinerlei Nervenzellkörper (Perikaryen) enthält, entsteht daraus die weisse Substanz des ZNS. Diese Anordnung zu drei Schichten bleibt im Rückenmark weitgehend erhalten, erfährt im Bereiche des Grosshirns und des Kleinhirns während der weiteren Entwicklung jedoch tiefgreifende Veränderungen. Diese Umgestaltungsvorgänge werden im Kapitel zur Gewebearchitektur des Gehirns ausführlicher behandelt.
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